植物組織培養(yǎng)的過(guò)程,植物組織培養(yǎng)的過(guò)程是什么？
根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性這個(gè)理論，近幾十年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)無(wú)性繁殖的新技術(shù)——植物的組織培養(yǎng)技術(shù)
植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)單過(guò)程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過(guò)脫分化（也叫去分化）形成愈傷組織——再經(jīng)過(guò)再分化形成組織或器官——經(jīng)過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成一顆完整的植株。
植物組織培養(yǎng)的大致過(guò)程是：在無(wú)菌條件下，將植物器官或組織（如芽、莖尖、根尖或花藥）的一部分切下來(lái)，放在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，這些器官或組織就會(huì)進(jìn)行細(xì)胞分裂，形成新的組織。不過(guò)這種組織沒(méi)有發(fā)生分化，只是一團(tuán)薄壁細(xì)胞，叫做愈傷組織。再適合的光照、溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與激素等條件下，愈傷組織便開(kāi)始分化，產(chǎn)生出植物的各種器官和組織，進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株。
植物組織培養(yǎng)即植物無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)，是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官如根、莖、葉、莖尖、花、果實(shí)等）組織（如形成層、表皮、皮層、髓部細(xì)胞、胚乳等）或細(xì)胞（如大孢子、小孢子、體細(xì)胞等）以及原生質(zhì)體,在無(wú)菌和適宜的人工培養(yǎng)基及光照、溫度等人工條件下，能誘導(dǎo)出愈傷組織、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的學(xué)科
植物組織的培養(yǎng)方法：
1、非試管微組織快繁
非試管微組織快繁技術(shù)是將外植體（一般要求帶一葉一芽）放置在室內(nèi)外普通沙子培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，利用植物腋芽自然倍增達(dá)到快速繁殖的目的。一般植物7～15天可以生長(zhǎng)出根系。此技術(shù)投資低，操作環(huán)節(jié)少。
2、試管組織培養(yǎng)
試管組織培養(yǎng)是將外植體（即離體組織、器官或細(xì)胞）放置在試管等器皿中在無(wú)菌的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得試管苗。
植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1、占用空間小，不受地區(qū)、季節(jié)限制。
2、不攜帶病毒
3、培養(yǎng)周期短
4、可用組培中的愈傷組織支取特殊的生化制品
5、可短時(shí)間大量繁殖，用于拯救瀕危植物
6、可誘導(dǎo)之分化成需要的器官，如根和芽
7、解決有些植物產(chǎn)種子少或無(wú)的難題，
8、不存在變異，可保持原母本的一切遺傳特征
9、投資少，經(jīng)濟(jì)效益高
10、繁殖方式多，試用品種多
植物組織培養(yǎng)一般分為以下幾種：
1、胚胎培養(yǎng)
指以從胚珠中分離出來(lái)的成熟或未成熟胚為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。
2、器官培養(yǎng)
指以植物的根、莖、葉、花、果等器官為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)，如根的根尖和切段，莖的莖尖、莖節(jié)和切段，葉的葉原基、葉片、葉柄、葉鞘和子葉，花器的花瓣、雄蕊（花藥、花絲）、胚珠、子房、果實(shí)等的離體無(wú)菌培養(yǎng)。
3、組織培養(yǎng)
指以分離出植物各部位的組織（如分生組織、形成層、木質(zhì)部、韌皮部、表皮、皮層、胚乳組織、薄壁組織、髓部等），或已誘導(dǎo)的愈傷組織為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。這是狹義的植物組織培養(yǎng)。
4、細(xì)胞培養(yǎng)
指以單個(gè)游離細(xì)胞（如用果酸酶從組織中分離的體細(xì)胞，或花粉細(xì)胞，卵細(xì)胞）為接種體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。
5、原生質(zhì)體培養(yǎng)。
指以除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。
培養(yǎng)材料的采集
要根據(jù)培養(yǎng)目的適當(dāng)選取材料，選擇原則：易于誘導(dǎo)、帶菌少。要選取植物組織內(nèi)部無(wú)菌的材料。這一方面要從健壯的植株上取材料，不要取有傷口的或有病蟲(chóng)的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，決不要在雨天、陰天或露水未干時(shí)取材料。因?yàn)榻训闹仓旰颓缣旃夂虾粑⒌慕M織，有自身消毒作用，這種組織一般是無(wú)菌的。培養(yǎng)材料的消毒
從外界或室內(nèi)選取的植物材料，都不同程度地帶有各種微生物。這些污染源一旦帶人培養(yǎng)基，便會(huì)造成培養(yǎng)基污染。因此，植物材料必須經(jīng)嚴(yán)格的表面滅菌處理，再經(jīng)無(wú)菌操作手續(xù)接到培養(yǎng)基上。
試劑
? 乙醇。
? 吲哚乙酸（ IAA） 或 2 ，4 – D （生長(zhǎng)素類(lèi)似物）。
? 氯化汞（升汞）或次氯酸鈉。
? 6- 芐基氨基腺嘌呤（ 6-BA ）
? MS 培養(yǎng)基
? 0.1 mol/L NaOH與 0.1 mol/L HCl
配制培養(yǎng)基
?。?1 ）愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基： MS 培養(yǎng)基（蔗糖含量為 10 g/L ， 2,4 – D 含量為 2 mg/L ，瓊脂 10 g/L ）。
（ 2 ）試驗(yàn)培養(yǎng)基：在 MS 培養(yǎng)基中加入 IAA 和 6–BA 。
吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 芐基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸餾水稀釋?zhuān)偌尤肱囵B(yǎng)基中。
儀器設(shè)備
培養(yǎng)室，高壓滅菌鍋，水浴鍋，解剖刀，三角燒瓶（ 100mL ），燒杯，量筒，培養(yǎng)皿，棉線，接種箱或超凈工作臺(tái)，分析天平，長(zhǎng)鑷子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮紙。
培養(yǎng)基滅菌
將配好的培養(yǎng)基加入瓊脂加熱溶解，調(diào)至 pH 5.8 ，趁熱分裝于 100 mL 三角燒瓶中，每瓶約 20 mL 。待培養(yǎng)基冷卻凝固后，用一層稱(chēng)量紙和一層牛皮紙包扎瓶（管）口，并用棉線扎牢，然后在高壓滅菌鍋中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下滅菌 20 min 。取出三角燒瓶放在臺(tái)子上，冷卻后備用。接種操作所需的一切用具（如長(zhǎng)鑷子、解剖刀、剪刀等）及滅菌水，需同時(shí)滅菌。
植物組織培養(yǎng)步驟
第一步，將采來(lái)的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細(xì)洗干凈，如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾?。把材料切割成適當(dāng)大小，即滅菌容器能放人為宜。置自來(lái)水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時(shí)，沖洗時(shí)間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細(xì)小的材料，可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗在污染嚴(yán)重時(shí)特別有用。洗時(shí)可加入洗衣粉清洗，然后再用自來(lái)水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質(zhì)性的物質(zhì)，便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然，最理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)—吐溫。
第二步是對(duì)材料的表面浸潤(rùn)滅菌。要在超凈臺(tái)或接種箱內(nèi)完成，準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無(wú)菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強(qiáng)，也很易殺傷植物細(xì)胞，所以浸潤(rùn)時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。有一些特殊的材料，如果實(shí)、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內(nèi)部的材料，則可只用70%酒精處理稍長(zhǎng)的時(shí)間。處理完的材料在無(wú)菌條件下，待酒精蒸發(fā)后再剝除外層，取用內(nèi)部材料。
第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類(lèi)較多，可根據(jù)情況選取1—2種使用見(jiàn)表。第四步是用無(wú)菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類(lèi)，涮洗3-l0次左右。無(wú)菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細(xì)胞的副作用注意：①酒精滲透性強(qiáng)，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時(shí)間要短，防止酒精殺死植物細(xì)胞。②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時(shí)間長(zhǎng)一些，如種子可以浸泡5分鐘。③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對(duì)植物材料的殺傷力不大。④漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠，所以對(duì)于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入濃度為0.08—0.12%的吐溫20或80（一種濕潤(rùn)劑），可以降低植物材料表面的張力，達(dá)到更好的消毒效果。
植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)
1、培養(yǎng)條件可以人為控制
組織培養(yǎng)采用的植物材料完全是在人為提供的培養(yǎng)基和小氣候環(huán)境條件下進(jìn)行生長(zhǎng)，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災(zāi)害性氣候的不利影響，且條件均一，對(duì)植物生長(zhǎng)極為有利，便于穩(wěn)定地進(jìn)行周年培養(yǎng)生產(chǎn)。
2、生長(zhǎng)周期短，繁殖率高
植物組織培養(yǎng)是由于人為控制培養(yǎng)條件，根據(jù)不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養(yǎng)條件，因此生長(zhǎng)較快。另外，植株也比較小，往往20-30天為一個(gè)周期。所以，雖然植物組織培養(yǎng)需要一定設(shè)備及能源消耗，但由于植物材料能按幾何級(jí)數(shù)繁殖生產(chǎn)，故總體來(lái)說(shuō)成本低廉，且能及時(shí)提供規(guī)格一致的優(yōu)質(zhì)種苗或脫病毒種苗。
3、管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制
植物組織培養(yǎng)是在一定的場(chǎng)所和環(huán)境下，人為提供一定的溫度、光照、濕度、營(yíng)養(yǎng)、激素等條件，極利于高度集約化和高密度工廠化生產(chǎn)，也利于自動(dòng)化控制生產(chǎn)。它是未來(lái)農(nóng)業(yè)工廠化育苗的發(fā)展方向。它與盆栽、田間栽培等相比省去了中耕除草、澆水施肥、防治病蟲(chóng)等一系列繁雜勞動(dòng)，可以大大節(jié)省人力、物力及田間種植所需要的土地。
希望對(duì)你有所幫助植物組織培養(yǎng)的過(guò)程！
