細胞培養(yǎng)瓶(細胞培養(yǎng)的注意事項是什么?)
1.細胞培養(yǎng)的注意事項是什么?
原代動物細胞培養(yǎng)：
1、實驗材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進行細胞分離實驗。
2、無菌操作。操作時用的培養(yǎng)液，可加平時細胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。
3、用酶法分離細胞時，注意酶液的濃度和控制消化時間。
貼塊法分離細胞時，注意動作要輕柔，不要傷到細胞組織，組織塊邊緣盡量平整有利于細胞游離。
4、培養(yǎng)液的選擇。不同的細胞有對培養(yǎng)液中營養(yǎng)的要求不同，根據(jù)所分離細胞的特性選擇。
傳代細胞培養(yǎng)：
1、無菌操作
2、控制消化時間
3、及時關注細胞生長狀態(tài)
2.細胞培養(yǎng)過程應該注意什么問題補充:可是很難保證完全無菌,很容易
細胞培養(yǎng)過程中的注意事項 ⑴溫度 溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。
利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導致細胞死亡。
這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的最適溫度決定的。多數(shù)生物大分子遇到高溫后容易導致空間結(jié)構改變或者喪失（變性）。
細胞膜遇到高溫后容易變態(tài)。在自然界，既有耐高溫的恒溫培養(yǎng)箱細胞，也有耐低溫的細胞。
在極端情況下生長的生物對付極端環(huán)境的機制研究在生物進化和農(nóng)業(yè)、環(huán)保、發(fā)酵工業(yè)中意義重大。 ⑵pH 過酸或過堿可導致細胞死亡。
這主要與蛋白質(zhì)的變性和細胞膜的結(jié)構受損有關。 ⑶滲透壓 細胞內(nèi)外可溶于水的物質(zhì)比例和種類決定細胞的膨脹與收縮程度，因為細胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)通過。
同一物質(zhì)在細胞內(nèi)外的分布的數(shù)量不同，當某一種極溶于水的物質(zhì)在細胞外濃度過大時，有可能導致細胞干癟死亡，這些物質(zhì)在細胞內(nèi)過多時導致細胞過量吸水膨脹。 細胞膜調(diào)節(jié)滲透壓的能力是有限的。
⑷營養(yǎng)物 營養(yǎng)物和水一起，又叫細胞培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中含有細胞增殖和生長所需要的各種物質(zhì)。營養(yǎng)物包括：N 源、C源，這些物質(zhì)與提供能量有關；無機鹽、維生素、激素，這些物質(zhì)與代謝調(diào)節(jié)控制有關。
細胞培養(yǎng)液的設計一直是細胞離體培養(yǎng)技術的關鍵。理想的細胞培養(yǎng)液可以同時解決細胞離體培養(yǎng)所需要的pH、滲透壓、營養(yǎng)物、調(diào)節(jié)物質(zhì)的全部需要。
在干細胞分化研究與應用中，關鍵是找到一種使干細胞分化成為所需細胞和組織的營養(yǎng)液。相同的人干細胞，放在不同的營養(yǎng)液中分化培養(yǎng)出人的各種臟器，這個昔日的夢想已經(jīng)開始成為現(xiàn)實。
植物細胞的組織培養(yǎng)技術已經(jīng)基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養(yǎng)蓮菜苗等植物細胞與組織培養(yǎng)技術的不斷完善，特別是由于組織培養(yǎng)液的商品化已經(jīng)被廣大農(nóng)民普遍接受。
⑸水 水是細胞需要數(shù)量最大的物質(zhì)，不同的物種、不同部位、不同生長期的細胞含水量差別相當大。 干旱植物細胞的含水量高達90%。
水的需求量一般隨同細胞培養(yǎng)液一起考慮。 ⑹無菌條件 體外細胞培養(yǎng)僅僅是對所需的細胞進行培養(yǎng)，但環(huán)境中（如空氣）有各種其他微生物，必須對所需細胞進行無雜菌的隔離培養(yǎng)。
無菌條件是細胞離體培養(yǎng)最基本的條件。 ⑺光 植物細胞和少數(shù)細菌需要利用光進行光合作用。
⑻氣體 動物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳，植物細胞與此相反。 二氧化碳的作用：調(diào)節(jié)pH，有緩沖作用，沒有刺激動物細胞呼吸的功能對不起，我記得也不是很清楚。
我只記得培養(yǎng)皿要消毒，然后培養(yǎng)過程中要加入抗生素（抑制細菌生長），希望能幫到你···。
3.細胞培養(yǎng)過程應該注意什么問題
細胞培養(yǎng)過程中的注意事項
⑴溫度
溫度過低時細胞生長緩慢甚至不生長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過高導致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的最適溫度決定的。多數(shù)生物大分子遇到高溫后容易導致空間結(jié)構改變或者喪失（變性）。細胞膜遇到高溫后容易變態(tài)。在自然界，既有耐高溫的恒溫培養(yǎng)箱細胞，也有耐低溫的細胞。在極端情況下生長的生物對付極端環(huán)境的機制研究在生物進化和農(nóng)業(yè)、環(huán)保、發(fā)酵工業(yè)中意義重大。
⑵pH
過酸或過堿可導致細胞死亡。這主要與蛋白質(zhì)的變性和細胞膜的結(jié)構受損有關。
⑶滲透壓
細胞內(nèi)外可溶于水的物質(zhì)比例和種類決定細胞的膨脹與收縮程度，因為細胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)通過。同一物質(zhì)在細胞內(nèi)外的分布的數(shù)量不同，當某一種極溶于水的物質(zhì)在細胞外濃度過大時，有可能導致細胞干癟死亡，這些物質(zhì)在細胞內(nèi)過多時導致細胞過量吸水膨脹。細胞膜調(diào)節(jié)滲透壓的能力是有限的。
⑷營養(yǎng)物
營養(yǎng)物和水一起，又叫細胞培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中含有細胞增殖和生長所需要的各種物質(zhì)。營養(yǎng)物包括：N 源、C源，這些物質(zhì)與提供能量有關；無機鹽、維生素、激素，這些物質(zhì)與代謝調(diào)節(jié)控制有關。細胞培養(yǎng)液的設計一直是細胞離體培養(yǎng)技術的關鍵。理想的細胞培養(yǎng)液可以同時解決細胞離體培養(yǎng)所需要的pH、滲透壓、營養(yǎng)物、調(diào)節(jié)物質(zhì)的全部需要。在干細胞分化研究與應用中，關鍵是找到一種使干細胞分化成為所需細胞和組織的營養(yǎng)液。相同的人干細胞，放在不同的營養(yǎng)液中分化培養(yǎng)出人的各種臟器，這個昔日的夢想已經(jīng)開始成為現(xiàn)實。植物細胞的組織培養(yǎng)技術已經(jīng)基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養(yǎng)蓮菜苗等植物細胞與組織培養(yǎng)技術的不斷完善，特別是由于組織培養(yǎng)液的商品化已經(jīng)被廣大農(nóng)民普遍接受。
⑸水
水是細胞需要數(shù)量最大的物質(zhì)，不同的物種、不同部位、不同生長期的細胞含水量差別相當大。干旱植物細胞的含水量高達90%。水的需求量一般隨同細胞培養(yǎng)液一起考慮。
⑹無菌條件
體外細胞培養(yǎng)僅僅是對所需的細胞進行培養(yǎng)，但環(huán)境中（如空氣）有各種其他微生物，必須對所需細胞進行無雜菌的隔離培養(yǎng)。無菌條件是細胞離體培養(yǎng)最基本的條件。
⑺光
植物細胞和少數(shù)細菌需要利用光進行光合作用。
⑻氣體
動物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳，植物細胞與此相反。
二氧化碳的作用：調(diào)節(jié)pH，有緩沖作用，沒有刺激動物細胞呼吸的功能
4.細胞培養(yǎng)時要注意哪些事項
即從短期、中期和長期三個階段來規(guī)劃本單位的科研目標，明確各個階段可以采用的科研工具、相關的資源需求、人員配置等要素；
相關的資源收集和管理
根據(jù)整體規(guī)劃中不同階段的資源需求，進行相關資源的收集和管理；與HIS、LIS等系統(tǒng)接口，信息更加集中，更加易于分析；
保存箱空間利用率
樣本積累到一定數(shù)量后，手工方式查找和存放樣本非常困難而且容易出錯，存放樣本的容器（例如冰箱、液氮罐）利用效率也會逐漸降低。因為一開始樣本可能是分類順序存放的，但是根據(jù)科研需求的不同，取樣會從容器的不同位置取走樣本，一段時間后，容器中會產(chǎn)生大量的零散空位卻無法有效利用。這就需要利用信息化系統(tǒng)來進行樣本存放位置的自動分配和查找，提高冰箱等容器的空間利用效率。
5.細胞培養(yǎng)應注意的無菌操作主要有哪些
1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。
2.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待30min以上，以排盡臭氧。 3.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。
4.風淋2分鐘。 5.0.1%過氧乙酸水泡手，擦干。
6.點燃酒精燈；超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品；使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。 7.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵；打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。
8.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。 9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。
10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。 11.操作完畢后恢復工作臺面。
