結(jié)核分枝桿菌的染色方法(抗酸染色的步驟和注意事項)

1.抗酸染色的步驟和注意事項

抗酸染色的基本原理：

分枝桿菌的植物細(xì)胞內(nèi)帶有很多的脂類，包圍著在肽聚糖的外邊，因此分枝桿菌一般不容易上色，要歷經(jīng)加溫和增加上色時間來促進其上色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染劑融合后，就難以被酸堿性脫色劑褪色，故稱抗酸染色。

齊-尼氏抗酸染色法是在加溫標(biāo)準(zhǔn)下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅堅固融合成一氧化氮合酶，用鹽酸乙醇解決都不褪色。當(dāng)再加偏堿美蘭復(fù)染后，分枝桿菌依然為鮮紅色，而別的病菌及情況中的物質(zhì)為深藍色。

抗酸染色一般流程

1）初染

用裝片夾夾緊抗酸染色標(biāo)本采集，滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴，在火苗高空緩緩加溫，切忌燒開，出現(xiàn)蒸氣即臨時離去，若染色液揮發(fā)降低，應(yīng)加上染色液，以防干枯，加溫3-5分鐘，待標(biāo)本采集制冷后自來水清洗。

2）褪色

3%鹽酸乙醇褪色30秒~1分鐘；自來水清洗。

3）復(fù)染

用偏堿美蘭水溶液復(fù)染1分鐘，水清洗，用吸水海綿吸走后用食油鏡觀查。